To'g'ri kulturani tanlash optimal hujayra o'sishi va eksperimental natijalarni ta'minlash uchun juda muhimdir. Hujayra madaniyati idishlarini tanlashda hujayra turi, madaniyatingizning o'ziga xos maqsadi, madaniyat miqyosi, madaniyat muhitining turi, tomirlarning materiallari va o'lchamlari, sirt ishlovlari, mos keladigan qopqoqlar kabi omillarni hisobga olish muhimdir. gaz almashinuvi va ularning laboratoriya jihozlari bilan mosligi.
To'g'ri hujayra madaniyati idishini tanlashda e'tiborga olish kerak bo'lgan asosiy omillar
1. Hujayra turiga qarab hujayra madaniyati idishini tanlang
Birikuvchi hujayralar
Bu hujayralar biriktirilishi va tarqalishi uchun sirtga muhtoj. Yopishqoq hujayralar uchun sizga hujayra biriktirilishi va o'sishi uchun etarli joyni ta'minlaydigan sirt maydoni bo'lgan tomirlar kerak bo'ladi.
Misollar To'qimalar kulturasi bilan ishlov berilgan kolbalar, petri idishlari va ko'p quduqli plitalar.
Suspension hujayralar
Bu hujayralar muhitda suzuvchi o'sadi, shuning uchun sirt hisobga olinmaydi.
2. O'lchamiga qarab hujayra madaniyati idishini tanlang (Hajm sig'imi)
Kichik o'lchamli madaniyatlar
Kichik hajmdagi tajribalar yoki yuqori o'tkazuvchanlik skrining uchun kichikroq idishlar idealdir.
Misollar Ko'p quduqli plitalar (6, 24, 96 hujayrali kultura plitalari),
Petri idishlari, yoki T25 kolbalari.
Katta miqyosli madaniyatlar
Agar siz katta miqdordagi hujayralarni o'stirmoqchi bo'lsangiz, kattaroq idishlar yoki bioreaktorlar yaxshiroqdir.
T75 va T175 hujayra madaniyati kolbalari, bioreaktorlar yoki suspenziyali hujayra madaniyati uchun spinner kolbalariga misollar.
3. Yuzaki ishlov berish asosida hujayra madaniyati idishini tanlang
To'qimalar madaniyati bilan ishlov berilgan yuzalar
Tomirlar hujayra biriktirilishini rag'batlantirish uchun oldindan davolanadi, bu ularni yopishtiruvchi hujayra turlariga mos keladi. Ular odatda kollagen, fibronektin yoki boshqa hujayradan tashqari matritsa komponentlari kabi moddalar bilan qoplangan.
Ishlov berilmagan yuzalar
Süspansiyon kulturalari uchun ideal yoki hujayralar sirtga yopishishi kerak bo'lmaganda. Ular odatda muhitda erkin o'sadigan hujayralar uchun ishlatiladi.
4. Materialga qarab hujayra madaniyati idishini tanlang
Polistirol odatda standart hujayra madaniyati ilovalari uchun ishlatiladi. Bu aniq, vizual tekshirishni osonlashtiradi va yopishtiruvchi va suspenziya hujayralari uchun yaxshi ishlaydi.
Polikarbonat yoki Polipropilen ma'lum bioreaktor ilovalari uchun va ko'proq moslashuvchanlikni yoki maxsus sirt ishlov berishni talab qiladigan idishlar uchun ishlatiladi.
Xarajat va sindiruvchanlik tufayli standart to'qimalar madaniyati uchun ishlatiladigan shisha, shisha idishlar maxsus ilovalar yoki keng ko'lamli madaniyatlar uchun mos bo'lishi mumkin.
Kolbalar
Umumiy hujayra madaniyati uchun odatda T-flaskalar (T25, T75, T150) ishlatiladi. Yassi sirt hujayra biriktirilishi va o'sishi uchun yaxshi maydonni ta'minlaydi. Tegishli sharoitlar saqlanib qolsa, ular yopishgan hujayralar uchun ham, suspenziya kulturalari uchun ham qo'llanilishi mumkin.
Petri idishlari
Kichik o'lchamdagi madaniyatlar va koloniya shakllanishi tahlillari kabi kuzatishni talab qiladigan tajribalar uchun keng tarqalgan.
Ko'p quduqli plitalar
Bular yuqori mahsuldorlikdagi skrining va kichikroq tajribalar uchun foydalidir. Plitalar 6, 12, 24, 48,
96, yoki 384 quduq mavjud bo'lib, ular hujayra asosidagi tahlillar, sitokinlarni chiqarish, dori sinovlari va boshqa yuqori o'tkazuvchanlik ilovalari uchun idealdir.
Spinner flakonlari
Hujayra o'sishini ta'minlash va hujayralar to'planishiga yo'l qo'ymaslik uchun, ayniqsa, nazorat ostida qo'zg'alish zarur bo'lgan katta hajmlarda, suspenziya hujayra madaniyati uchun ishlatiladi.
Bioreaktorlar
Keng ko'lamli suspenziya madaniyati uchun bioreaktorlar atrof-muhit sharoitlarini (masalan, pH, harorat, kislorod bilan ta'minlash) yanada murakkab nazorat qilish imkonini beradi va biofarmatsevtika ishlab chiqarish kabi katta hajmli ishlab chiqarish uchun ishlatiladi.
6. Sterillik va ventilyatsiya asosida hujayra madaniyati idishini tanlang
Sterillik
Kontaminatsiyani oldini olish uchun idish steril yoki sterillanganligiga ishonch hosil qiling. Ko'pgina savdo madaniyatli idishlar oldindan sterilizatsiya qilinadi, lekin har doim qadoqni tekshiring.
Ventilyatsiya
Ba'zi idishlar, masalan, kolbalar, ifloslanishning oldini olish uchun havo almashinuvini ta'minlash uchun ventilyatsiya qilingan qopqoqlar yoki filtrlar bilan birga keladi. Bu yuqori zichlikdagi sharoitlarda hujayralarni etishtirishda juda muhimdir.
7. Foydalanish qulayligi asosida hujayra madaniyati idishini tanlang
Avtoklavlanadigan va bir marta ishlatiladigan
Ba'zi madaniy idishlar qayta foydalanish uchun avtoklavlanishi mumkin (masalan, shisha butilkalar, ba'zi plastik kolbalar), boshqalari bir martalik va bir martalik (masalan, plastik petri idishlari, ko'p quduqli plitalar).
Ishlov berish va tashish
Tomirlar orasidagi hujayralarni o'tkazish qulayligini ko'rib chiqing. Misol uchun, ko'p quduqli plitalar avtomatlashtirilgan pipetkalar kabi uskunalar bilan oson ishlov berish uchun maxsus plitalarni talab qilishi mumkin.
8. Madaniy muhit hajmiga qarab hujayra madaniyati idishini tanlang
Resurslarni isrof qilmasdan kerakli hajmdagi madaniyat muhitini sig'dira oladigan idishni tanlang. Agar katta hajmli kultura bilan ishlayotgan bo'lsa, kattaroq idishlar yoki bioreaktorlar kerak bo'lishi mumkin, kichikroq hajmlar esa hujayra madaniyati idishlari yoki plitalari uchun mos keladi.
9. Xarajatlarni hisobga olgan holda hujayra madaniyati idishini tanlang
Bir martalik va qayta foydalanish mumkin
Bir martali ishlatiladigan plastik idishlar tejamkor va ifloslanish xavfini kamaytiradi, ammo ular keng ko'lamli operatsiyalar uchun qimmat bo'lishi mumkin. Qayta foydalanish mumkin bo'lgan shisha idishlar yuqori narxga ega, ammo sterilizatsiya qilinishi va bir necha marta qayta ishlatilishi mumkin, bu ularni uzoq muddatli foydalanish uchun yanada tejamkor qiladi.
Ovoz samaradorligi
Materiallarni isrof qilmaslik uchun idish o'lchami mos kelishiga ishonch hosil qiling, ayniqsa qimmat o'sish vositalari yoki reagentlardan foydalanganda.
10. Muayyan dastur talablari asosida hujayra madaniyati idishini tanlang
Tasvirlash
Agar siz mikroskop ostida hujayralarni ko'rishingiz kerak bo'lsa, tasvirni o'rnatishingiz uchun optik jihatdan aniq materiallar va mos o'lchamlarga ega idishlarni tanlang (masalan, yuqori kontentli skrining uchun ko'p quduqli plitalar yoki jonli hujayra tasviri uchun shisha taglik idishlar).
Boshqariladigan ajitatsiya
Suspension hujayra kulturalari uchun hujayralarni bir tekis to'xtatib turish uchun nazorat ostida qo'zg'atishni ta'minlaydigan spinner flakonlarini yoki bioreaktorlarini ko'rib chiqing.
Xulosa
To'g'ri hujayra madaniyati idishini tanlash bir nechta omillarni, jumladan hujayra turini, madaniyat ko'lamini, materialning mosligini va maxsus eksperimental ehtiyojlarni muvozanatlashni talab qiladi. Yopishqoq hujayralar biriktirilishini rag'batlantiradigan sirtlarni talab qiladi, suspenziya hujayralari esa katta hajm va qo'zg'alishdan foyda ko'radi. Kichik hajmdagi ishlar uchun ko'p quduqli plitalar yoki T-kolbalar etarli bo'lishi mumkin, kattaroq kulturalar uchun spinner kolbalari yoki bioreaktorlar talab qilinishi mumkin. Har doim idishlar sterillik va ishlov berish talablaringizga javob berishiga ishonch hosil qiling va foydalanishingizga qarab iqtisodiy samaradorlikni hisobga oling.
Ushbu omillarni hisobga olgan holda, siz hujayra madaniyati va eksperimental maqsadlar uchun to'g'ri sharoitlarni ta'minlaydigan optimal idishni tanlashingiz mumkin.