"Barchamizga ma'lumki, PCR biokimyoviy laboratoriyalarda asosiy eksperimental usuldir." Eksperimental natijalar har doim qoniqarli emas, bu PCR plastik sarf materiallarining ozgina ifloslanishi yoki ingibitorlarning kiritilishi natijasida yuzaga kelgan eksperimental shovqin bilan bog'liq bo'lishi mumkin. Yana bir juda muhim sabab bor: sarf materiallarini noto'g'ri tanlash ham eksperimental natijalarga katta ta'sir qiladi.
PCR tajribalari natijalariga ta'sir qiluvchi ko'plab sabablar mavjud: odatda quyidagi 7 tur mavjud.
1. Primerlar: Primerlar PCRning o'ziga xos reaktsiyasining kalitidir va PCR mahsulotlarining o'ziga xosligi primerlar va shablon DNK o'rtasidagi komplementarlik darajasiga bog'liq;
2. Ferment va uning konsentratsiyasi;
3. dNTP ning sifati va kontsentratsiyasi;
4. Shablon (maqsadli gen) nuklein kislota;
5. Mg2+ konsentratsiyasi;
6. Harorat va vaqtni sozlash;
7. Tsikllar soni;
8. Uskunalar, sarf materiallari va boshqalar.
Ko'p ta'sir qiluvchi omillar orasida sarf materiallari juda muhim va osonlikcha e'tibordan chetda qoladigan omillardan biridir.
Ko'p turlari mavjud
PCR sarf materiallari: 8-naychalar, kam hajmli quvurlar, standart quvurlar, etagi bo'lmagan, yarim etakli, to'liq etakli va bir qator PCR va qPCR plitalari. Tanlash juda qiyin va ko'plab umumiy muammolar mavjud, keling, hamma tanlagan muammolarni ko'rib chiqaylik.
PCR sarf materiallari, va ularni qanday hal qilish kerak?
Nima uchun
PCR sarf materiallariodatda PPdan qilinganmi?
Javob: PCR / qPCR sarf materiallari odatda polipropilendan (PP) ishlab chiqariladi, chunki u biologik inert materialdir, sirt biomolekulalarga yopishishi oson emas va yaxshi kimyoviy qarshilik va haroratga bardoshli (121 daraja avtoklavda bo'lishi mumkin) bakteriyalarga ega. va termal aylanish jarayonida harorat o'zgarishiga ham bardosh bera oladi). Ushbu materiallar odatda reagentlar yoki namunalar bilan bevosita aloqada bo'ladi, shuning uchun ishlab chiqarish va tayyorlash jarayonida yuqori sifatli materiallar va yaxshi ishlov berish usullarini tanlash kerak.