Asosiy kirish
Eritrotsitlar lizati qizil qon hujayralarini olib tashlashning eng oddiy va oson usullaridan biridir, ya'ni qizil qon hujayralarini lizat bilan ajratish, yadroli hujayralarga zarar bermaydi va qizil qon tanachalarini to'liq olib tashlashi mumkin. Lizat parchalanishi - bu qizil qon hujayralarini olib tashlashning engil usuli bo'lib, u asosan ferment hazm qilish orqali tarqalgan to'qimalar hujayralarini ajratish va tozalash, limfotsitlarni ajratish va tozalash, to'qima oqsili va nuklein tajribalarida qizil qon hujayralarini olib tashlash uchun ishlatiladi. kislota ekstraktsiyasi. Qizil qon hujayralari lizati natijasida olingan to'qima hujayralari qizil qon hujayralarini o'z ichiga olmaydi va keyinchalik birlamchi madaniyat, hujayra sintezi, oqim sitometriyasi, nuklein kislotasi va oqsilni ajratish va ekstraktsiya qilish uchun ishlatilishi mumkin.
Foydalanish bo'yicha ko'rsatmalar
To'qima hujayralari namunasi
1. Yangi to'qimalar oshqozon osti bezi / ferment yoki kollagenaz tomonidan hazm qilindi va bitta hujayra suspenziyasiga tarqaldi va supernatant santrifüj orqali tashlandi.
2. ELS lizatini muzlatgichdan 4 da oling, ELS lizatini 1:3-5 nisbatda hujayra cho'kmasi qo'shing (siqilgan 1 ml hujayraga 3-5 ml lizat qo'shing), sekin puflang va aralashtiring.
3. 5-8 daqiqa davomida 800-1000 rpm tezlikda santrifüj qiling va yuqori qizil rangli shaffof suyuqlikni tashlang.
4. Cho'kma qismi yig'ildi va Hank eritmasi yoki sarumsiz kultura eritmasi bilan 2-3 marta santrifüj qilindi.
5, agar yorilish to'liq bo'lmasa/to'liq bo'lmasa, 2 va 3-bosqichlarni takrorlash mumkin.
6. Keyingi tajribalar uchun resuspension hujayralar; Agar RNK olinadigan bo'lsa, buni DEPC suvidan foydalangan holda 4-bosqichda tayyorlangan eritmada qilish yaxshidir
Qizil qon hujayralarining hayot aylanishi juda qisqa, bor-yo'g'i 120 kun, lekin ular qonni juda tez ko'paytiradilar va bu holda ular hujayra bo'linishiga ayniqsa qodir va ular eng tez bo'linadigan hujayralardir, shuning uchun bu hujayra juda qimmatlidir, shuning uchun u hujayra madaniyati uchun juda foydali. Bu juda oddiy, uning tarkibida organellalar yo'q, faqat hujayra membranalari va oqsillar mavjud.